Università degli Studi di Perugia

Esame scritto con domande a risposta multipla ed esame orale

 6,27 set 2013; 

Parte teorica:

Principi generali della ricerca di nuovi farmaci: perché e come si ricercano nuovi farmaci, il contributo della biologia molecolare, la ricerca ‘in silico’ dei farmaci, lo sviluppo di un farmaco, GLP, GCP, GMP. Glivec: un esempio di sviluppo farmaceutico. L’enzima IDO come target farmacologico: meccanismo d’azione dell’enzima, potenziale terapeutico dell’enzima. PCR e Real-time PCR: due strumenti per valutare l’effetto farmacologico sulla trascrizione genica. High throughput screening (HTS): un metodo di selezione di molecole ‘lead’. Microarray: una tecnica di studio preclinico di farmaci sulla trascrittomica. Sperimentazione preclinica in vitro e ex vivo: le colture cellulari e gli organi isolati. Sperimentazione preclinica in vivo: la regola delle 3 R; metodi alternativi all’utilizzo di animali; gli animali da esperimento; ceppi inbred, outbred, ibridi; norme per la sperimentazione in vivo, la stabulazione degli animali; Test di Irwin; modelli sperimentali spontanei, comportamentali, indotti per via biologica, per via farmacologica, per manipolazione chirurgica; modelli sperimentali oncologici, l’oncotopo; modelli sperimentali manipolati geneticamente: generazione di topi transgenici, knock-out, knock-in e transgenici/knock-out condizionali. Sperimentazione clinica: norme per la sperimentazione clinica, protocollo sperimentale, ipotesi scientifica, gli end-point primari e secondari, i criteri di selezione dei pazienti, i fattori noti di variabilità, i fattori di confondimento (bias), studio clinico controllato, randomizzazione del campione, sperimentazione in cieco, il placebo. Fasi della sperimentazione clinica: obiettivi e metodologie. Principi di biostatistica: la popolazione biologica ed il concetto di variabilità biologica, ipotesi clinica e ipotesi statistica, test di significatività, errore di tipo I o II, la potenza di uno studio clinico. Gli organismi geneticamente modificati (OGM): vantaggi e problematiche delle piante biotecnologiche, vaccini orali biotecnologici, animali transgenici come bioreattori, farmaci ricombinanti. I microRNA come nuovo target farmacologico. Tossicologia speciale: Il prolungamento dell’intervallo QT, un grave effetto avverso di molti farmaci. Overdose non intenzionale da analgesici oppioidi.

Esercitazioni multimediali:

Sperimentazione in vivo: Mouse Watch, studio osservazionale dell’effetto farmacologico.

Sperimentazione con organi isolati: Il cuore alla Langerdorf .

Parte sperimentale:

Clonaggio, espressione e validazione di un target farmacologico: l’enzima IDO. Purificazione e attivazione in vitro di splenociti murini. Estrazione di RNA, retrotrascrizione in cDNA e amplificazione per PCR della sequenza codificante IDO. Inserimento della sequenza codificante IDO in un vettore di espressione. Trasformazione batterica e screening delle colonie batteriche. Trasfezione di cellule eucariotiche per l’espressione proteica dell’enzima IDO. Verifica dell’espressione di IDO mediante elettroforesi su gel di acrilamide e western blot. Analisi dell’attività trascrizionale del gene IDO1, mediante tecnica del gene reporter.

Basi farmacologiche e sperimentali per lo sviluppo di nuovi farmaci. Principi di valutazione dell’efficacia e tossicità dei farmaci. Sperimentazione preclinica e clinica. Clonaggio e validazione di un target farmacologico.

L'insegnamento di ETFS prevede lezioni frontali, esercitazioni multimediali e lezioni pratiche.

Paoletti R., Nicosia S., Clementi F., Fumagalli G. Trattato di farmacologia e terapia - vol. Farmacologia clinica. e vol. farmacologia generale e molecolare. UTET

Richard J Reece ‘Analisi dei geni e dei genomi’ EDISES

Jeremy W. Dale e Malcolm von Schantz ‘Dai geni ai genomi’ EDISES

Acquisizione dei principi e dei metodi d'indagine sperimentale in ambito farmacologico.

Coincidenti con l'orario del secondo semestre.

Coincidenti con l'orario del secondo semestre.

Frequenza obbligatoria

Aula Seppilli, aula informatica e laboratorio didattico biochimico-farmacologico

Dipartimento di Medicina Sperimentale e Scienze Biochimiche

via Del Giochetto - Monteluce