Università degli Studi di Perugia

esame orale

consultare il sito web della facoltà

-       Introduzione dogma centrale della biologia molecolare. Cellule eucariotiche e procariotiche.

-       Struttura del DNA. Strutture alternative del DNA (A, B, Z). Conformazioni del DNA e superstrutture: superavvolgimento, topoisomerasi. Cromosomi: cromatina, nucleosomi, istoni, l’organizzazione del genoma. Definizione del gene. Il genoma eucariotico. Transposoni. Il genoma batterico. Plasmidi. Batteriofagi

-       Replicazione del DNA. Sintesi del DNA negli eucarioti (nucleo ed organelli) e nei procarioti. Le DNA polimerasi. Replicazione semiconservativa e semidiscontinua del DNA. Telomerasi e loro ruolo

-       Denaturazione del DNA e rinaturazione. Effetto ipercromico

-       Mutazioni del DNA e sistemi di riparazione a carico delle singole basi e del doppio filamento

-       Struttura dell’RNA. Tipi di RNA: mRNA, rRNA, tRNA

-       Trascrizione nei procarioti e negli eucarioti. Macchinario e meccanismo della trascrizione: l'inizio, l'allungamento e la terminazione.Fattori di trascrizione, coattivatori e corepressori. Regolazione della trascrizione

-       Regolazione epigenetica dell’espressione. Modificazioni degli istoni, eucromatina e eterocromatina.

-       Regolazione post-trascrizionale dei geni. Splicing dell’RNA e splicing alternativo. Modificazioni cotrascrizionali del pre-mRNA nucleare.

-       Traduzione nei procarioti e negli eucarioti: codice genetico e meccanismo della traduzione. Amminoacil-tRNA sintetasi. Regolazione della traduzione

-       Tecnologia del DNA ricombinante e clonaggio molecolare: endonucleasi di restrizione, vettori di clonaggio, ligasi. Trasformazione batterica. Purificazione DNA plasmidico e cromosomico. Elettroforesi acidi nucleici. Mappa di restrizione. Southern blotting. Northern blotting. Metodi marcatura DNA. Le sonde. Librerie genomiche e a cDNA. Lo screening delle librerie. Librerie Jumping e linking. Clonaggio funzionale e posizionale. Sequenziamento del DNA.

-       Il polimorfismo di lunghezza dei frammenti di restrizione (RFLP). Microsatelliti. VNTR. Studio del mappaggio e della struttura del gene. Studio dell’espressione e della funzione del gene. Studio dei genomi. Mutagenesi sito-specifica. SNP. Two hybrid system. Real time PCR. SAGE. Microarray. Analisi del promotore. 5’ race. Ibridazione in situ. Nuovi metodi di sequenza del DNA. EST (expression sequence tagged.

STRUTTURA DEL DNA - STRUTTURA  RNA - DUPLICAZIONE DNA - TRASCRIZIONE E SUA REGOLAZIONE - CODICE GENETICO - TRADUZIONE E SUA REGOLAZIONE - MUTAZIONI - - DENATURAZIONE DNA- ENZIMI DI RESTRIZIONE E MODIFICAZIONE . DNA POLIMERASI - VETTORI DI CLONAGGIO - PURIFICAZIONE DNA PLAMIDICO E CROMOSOMICO - ELETROFORESI ACIDI NUCLEICI  MAPPA DI RESTRIZIONE-- SOUTHERN BLOTTING - NORTHERN BLOTTING-   -METODI MARCATURA DNA (RadioattiVi e non Radioattivi) LIBRERIE DI cDNA,GENOMICHE , SCREENING LIBRERIE - Librerie JUMPING E LINKING - CLONAGGIO FUNZIONALE E POSIZIONALE - RFLP - MICROSATELLITI - VNTR -STUDIO DEL MAPPAGGIO E DELLA STRUTTRA DEL GENE -. STUDIO DELL'ESPRESSIONE E DELLA FUNZIONE DEL GENE -STUDIO DEI GENOMI MUTAGENESI SITO-SPECIFICA - SNP - TWO HYBRID SYSTEM - REAL-TIME PCR -SAGE -MICROARRAY- ANALISI DEL PROMOTORE - 5'RACE - 3-RACE - IBRIDAZIONE IN SITU -NUOVI METODI DI SEQUENZA DEL DNA- EST (EXPRESSION SEQUENCE TAGGED).

lezioni teoriche

- Biologia molecolare. Principi e tecniche. Cox Michael M. - Doudna Jennifer - O'Donnell Michael. Ed Zanichelli

- Fondamenti di Biologia Molecolare. Lizabeth A. Allison Ed Zanichelli

- Bruce Alberts et al. Biologia molecolare della cellula. Zanichelli. 

ll corso consente allo studente di disporre delle conoscenze di base dei principi e delle metodologie di biologia molecolare 

consultare il sito web della facoltà

consultare il sito web della facoltà

obbligatoria

via del giochetto