Insegnamento METODOLOGIE BIOCHIMICHE
- Corso
- Biologia
- Codice insegnamento
- GP004082
- Curriculum
- Biomolecolare
- Docente
- Serena Porcellati
- Docenti
-
- Serena Porcellati
- Sandra Buratta (Codocenza)
- Elisabetta Chiaradia (Codocenza)
- Ore
- 25 ore - Serena Porcellati
- 12 ore (Codocenza) - Sandra Buratta
- 10 ore (Codocenza) - Elisabetta Chiaradia
- CFU
- 6
- Regolamento
- Coorte 2022
- Erogato
- 2022/23
- Attività
- Affine/integrativa
- Ambito
- Attività formative affini o integrative
- Settore
- BIO/10
- Tipo insegnamento
- Opzionale (Optional)
- Tipo attività
- Attività formativa monodisciplinare
- Lingua insegnamento
- ITALIANO
- Contenuti
- Strumentazione e principi di base dei metodi biochimici; tecniche di centrifugazione,
ultrafiltrazione, dialisi; cromatografia e applicazioni allo studio
delle proteine. - Testi di riferimento
- Keith Wilson and John Walker: Biochimica e biologia molecolare:Principi e tecniche¿ EDs. 2019 Raffaello Cortina Editore. ¿
M.Maccarrone: Metodologie Biochimiche e Biomolecolari, Zanichelli Editore
Bonaccorsi, Contestabile, Di Salvo -Metodologie biochimiche-Casa Editrice Ambrosiana. Distrib. Zanichell - Obiettivi formativi
- Conoscenze: lo studente deve conoscere le metodiche maggiormente utilizzate in studi biochimici per le analisi quali/quantitative delle principali macromolecole biologiche.
- Prerequisiti
- Conoscenze di base di Chimica Organica e di Biochimica
- Metodi didattici
- Lezioni frontali in aula svolte con l'ausilio di proiezioni di diapositive
- Altre informazioni
- Frequenza facoltativa .
- Modalità di verifica dell'apprendimento
- Colloquio sugli argomenti del corso durante l'esame completo tenuto insieme agli altri docenti.
- Programma esteso
- Introduzione:
come si progetta, si esegue e si interpreta un esperimento
Lavorare in laboratorio:
Strumentazione di base
Le soluzioni.
Estrazione delle proteine dalla fonte biologica: Rottura delle cellule e omogeneizzazione dei tessuti.
Separazione di organelli o componenti subcellulari.
Metodi di frazionamento di miscele proteiche: Tecniche di centrifugazione
e metodi di precipitazione delle proteine.
Tecniche cromatografiche: introduzione.
La cromatografia a esclusione molecolare o gel-filtrazione.
La cromatografia a scambio ionico.
La cromatografia di affinità.
La cromatografia di ripartizione: su strato sottile.
La cromatografia di adsorbimento: su idrossiapatite o per interazioni idrofobiche.
La cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC).
La cinetica enzimatica:
L'energia di attivazione e la teoria dello stato di transizione.
Cinetica enzimatica in stato stazionario e l'equazione di Michaelis-Menten.
Il significato della Km, della Vmax.
Il grafico di Lineweaver- Burk.
L'inibizione enzimatica: competitiva, incompetitiva, mista.